2022主管中药师药理学考点精讲：中药有效成份的分离方法

2022主管中药师药理学考点精讲：中药有效成份的分离方法

(一)溶剂法

1.酸碱溶剂法

碱性成分：如生物碱可与无机酸成盐溶于水，借此可与非碱性难溶于水的成分分离。

酸性成分：含羧基或酚羟基的酸性成分，难溶于酸水可与碱成盐而溶于水。

内酯或内酰胺结构成分：可被皂化溶于水，借此与其他难溶于水的成分分离。

(使用注意：酸性或碱性的强度、与被分离成分接触的时间、加热温度和时间等，避免在剧烈反应，某些化合物结构发生变化或结构不能恢复到原存于中药中的状态。)

2.溶剂分配法

原理：利用混合物中各成分在两相溶剂中分配系数不同而达到分离的方法。

(二)沉淀法

1.专属试剂沉淀法

雷氏铵盐→生物碱。

胆甾醇→甾体皂苷。

明胶→鞣质。

2.分级沉淀法

在混合组分的溶液中加入与该溶液能互溶的溶剂，改变混合组分溶液中某些成分的溶解度，使其从溶液中析出。如：

(1)含有糖类或蛋白质的水溶液中，分次加入乙醇，使含醇量逐步增高，逐级沉淀出分子量段由大到小的蛋白质、多糖、多肽等;

(2)在含皂苷的乙醇溶液中分次加入乙醚或乙醚-丙酮混合液可使极性有差异的皂苷逐段沉淀出来。

3.盐析法

在混合物水溶液中加入易溶于水的无机盐(最常用的是氯化钠)至一定浓度或饱和状态，使某些中药成分在水中溶解度降低而析出，或用有机溶剂萃取出来。如从三颗针中分离小檗碱。

(三)结晶法

原理：利用混合物中各成分在溶剂中的溶解度不同达到分离的方法。

溶剂的要求：对被溶解成分的溶解度随温度不同应有显著差别;与被结晶的成分不应产生化学反应;沸点适中等。

常用于结晶的溶剂：甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸、吡啶等。(单用或混用)。

(四)膜分离法

利用天然或人工合成的高 分子膜，以外加压力或化学位差为推动力，对混合物溶液中的化学成分进行分离、分级、提纯和富集。

原理：利用分子大小不同进行分离。

四大膜分离技术：反渗透、超滤、微滤、电渗析。

(五)色谱法

1.吸附色谱

原理：利用吸附剂对被分离化合物分子的吸附能力的差异，而实现分离的一类色谱。

常用的吸附剂包括硅胶、氧化铝、活性炭、聚酰胺等。

色谱方式通常为薄层色谱和柱色谱。

2.凝胶过滤色谱(排阻色谱、分子筛色谱)

原理：分子筛作用。根据凝胶的孔径和被分离化合物分子的大小不同而达到分离的目的。

常用的凝胶：葡聚糖凝胶(亲水性)和羟丙基葡聚糖凝胶(亲水性、亲脂性)。

3.分配色谱

原理：利用被分离成分在固定相和流动相之间的分配系数的不同而达到分离。

正相：流动相的极性小于固定相极性。常用的固定相有氰基与氨基键合相。主要用于分离极性及中等极性的分子型物质。

反相：流动相的极性大于固定相极性。常用的固定相有十八烷基硅烷(ODS)或C8键合相。主要用于分离非极性及中等极性的各类分子型化合物。

4.大孔树脂色谱

原理：(1)选择性吸附;(2)分子筛性能。

大孔树脂的色谱行为具有反相的性质。被分离物质的极性越大，其Rf值越大，反之Rf值越小。对洗脱剂而言，极性大的溶剂洗脱能力弱，而极性小的溶剂则洗脱能力强，故大孔树脂在水中的吸附性强。实际工作中，常先将欲分离的混合物的水溶液通过大孔树脂柱后，依次用水、浓度由低到高的含水甲(乙)醇溶液、甲(乙)醇洗脱，可将混合物分离成若干组分。

优点：选择性好、机械强度高、再生处理方便、吸附速度快等。

5.离子交换色谱

原理：基于混合物中各成分解离度差异进行分离。

离子交换树脂对交换化合物的能力强弱，主要取决于化合物解离度的大小，带电荷的多少等因素。化合物解离度大(酸性、碱性强)易交换在树脂上，相对来说难洗脱。

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