干扰核酸生物合成的药物属于细胞周期特异性抗肿瘤药，分别在不同环节阻止DNA的合成，抑制细胞分裂增殖，属于抗代谢药。根据药物主要干扰的生化步骤或所抑制的靶酶的不同，可进一步分为：①二氢叶酸还原酶抑制剂(抗叶酸剂)，如甲氨蝶呤(MTX)等；②胸苷酸合成酶抑制剂，影响尿嘧啶核苷的甲基化(抗嘧啶剂)，如氟尿嘧啶(5-FU)，替加氟(FT207)及优福定(UFT)等；③嘌呤核苷酸互变抑制剂(抗嘌呤剂)，如巯嘌呤(6-MP)，6-硫鸟嘌呤(6-TG)等；④核苷酸还原酶抑制剂，羟基脲(HU)；⑤DNA多聚酶抑制剂，如阿糖胞苷(ErEB)等。

拓扑异构酶抑制药直接抑制拓扑异构酶，阻止DNA复制及抑制RNA合成。包括拓扑异构酶I抑制药和拓扑异构酶Ⅱ抑制药，拓扑异构酶I抑制药的代表药有依立替康、拓扑替康、羟喜树碱；拓扑异构酶Ⅱ抑制药的代表药有依托泊苷、替尼泊苷。

长春新碱(VCR)、长春碱(VLB)、紫杉醇及秋水仙碱等属于干扰有丝分裂、影响微管蛋白装配的药物，干扰有丝分裂中纺锤体的形成，使细胞停止于分裂中期。